图书介绍
流式细胞术 原理及操作技巧PDF|Epub|txt|kindle电子书版本网盘下载
- 陈朱波，曹雪涛编著 著
- 出版社： 北京：科学出版社
- ISBN：9787030291714
- 出版时间：2010
- 标注页数：216页
- 文件大小：41MB
- 文件页数：231页
- 主题词：细胞－生物样品分析－定量分析
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图书目录
1 概述1
1.1 流式细胞术基本概念2
1.2 分析型流式细胞仪介绍5
1.3 分选型流式细胞仪介绍9
参考文献13
2 流式细胞仪的原理14
2.1 液流系统15
2.2 光路系统18
2.3 检测分析系统28
2.4 分选系统31
参考文献36
3 流式图37
3.1 流式通道38
3.2 流式直方图39
3.3 流式散点图42
3.4 流式等高线图44
参考文献46
4 流式细胞术的基本操作与技巧48
4.1 样品制备49
4.1.1 独立细胞样品制备49
4.1.2 免疫器官样品制备51
4.1.3 实体脏器样品制备52
4.2 荧光素偶联抗体及其标记方法53
4.2.1 荧光素53
4.2.2 荧光素偶联抗体57
4.2.3 样品封闭58
4.2.4 荧光素偶联抗体标记60
4.3 光电倍增管电压设定62
4.4 对照的设置65
4.4.1 阴性对照的设置65
4.4.2 FMO对照68
4.4.3 阳性对照的设置68
4.5 补偿调节69
4.5.1 补偿调节的原理70
4.5.2 调节补偿的具体方法71
4.5.3 三色和四色分析补偿调节方法74
4.5.4 影响补偿大小的因素76
4.6 阈值设定78
4.7 流式分析中的死细胞问题79
4.7.1 减少样品中死细胞比例的方法79
4.7.2 流式分析时区分死细胞和活细胞的方法80
4.8 流式分选模式选择85
4.8.1 纯化模式86
4.8.2 富集模式87
4.8.3 单细胞模式87
4.9 上样速度控制88
4.9.1 流式分析速度控制89
4.9.2 流式分选速度控制89
4.10 分选设门基本原则91
4.11 流式分选基本步骤93
参考文献94
5 流式分析术的应用96
5.1 细胞群比例测定97
5.2 表型测定101
5.3 检测细胞因子106
5.3.1 胞内染色法检测细胞因子107
5.3.2 胞内染色法与ELISA法比较112
5.3.3 CBA法测定细胞因子114
5.3.4 CBA法与ELISA法比较116
5.4 检测细胞增殖117
5.4.1 相对计数法118
5.4.2 示踪染料标记法122
5.4.3 Brdu标记法127
5.4.4 其他方法129
5.5 检测细胞凋亡130
5.5.1 annexin V/PI双染色法131
5.5.2 SYTO/PI双染色法133
5.5.3 细胞DNA含量分析法检测细胞凋亡134
5.5.4 线粒体损伤检测法135
5.5.5 活化的caspase-3检测法139
5.5.6 荧光素偶联的caspase抑制剂（FLICA）标记法139
5.5.7 甲酰胺诱导ssDNA单抗检测法140
5.5.8 TUNEL法141
5.6 检测细胞周期142
5.6.1 非特异性核酸荧光染料标记法142
5.6.2 特异性细胞周期调节蛋白检测法147
5.7 检测细胞杀伤能力148
5.8 检测细胞吞噬功能151
5.9 检测胞内活化的激酶153
5.10 检测基因表达154
5.10.1 GFP报道基因系统155
5.10.2 lacZ报道基因系统156
5.10.3 β-内酰胺酶报道基因系统157
5.11 微生物学中的应用157
5.11.1 荧光素偶联抗体直接检测法158
5.11.2 抗体结合人工荧光微球直接检测法159
5.11.3 微生物活性流式检测160
5.11.4 人工微球荧光免疫试验检测抗体160
5.11.5 荧光原位杂交流式检测法161
5.11.6 PCR免疫微珠法162
5.11.7 原位PCR杂交流式检测法163
5.12 检测钙相关分子163
5.12.1 检测细胞内游离的钙离子水平163
5.12.2 检测钙蛋白酶活性164
5.12.3 检测细胞膜钙泵活性166
5.13 表观遗传学中的应用168
5.13.1 ChIP-on-beads法169
5.13.2 检测细胞水平组蛋白修饰情况171
5.14 检测缝隙连接介导的细胞通讯172
5.15 检测细胞内pH和钠氢转运体活性175
5.15.1 检测细胞内pH175
5.15.2 检测钠氢转运体活性176
5.16 其他应用177
5.16.1 检测活性氧簇177
5.16.2 检测细胞内游离的锌离子水平178
5.16.3 荧光共振能量转移结合流式细胞术检测两种蛋白质的直接结合180
5.16.4 检测端粒长度181
5.16.5 检测脂筏结合蛋白183
引文目录185
参考文献188
6 流式分选术的应用193
6.1 流式分选与磁性分选194
6.2 流式分选独立群体细胞196
6.3 流式分选非独立细胞群体198
6.4 流式分选低比例细胞群体202
6.4.1 强势细胞群的辐射影响202
6.4.2 流式分选结合磁性分选203
6.4.3 二次分选法204
6.5 流式分选干细胞206
6.5.1 流式分选造血干细胞206
6.5.2 流式分选侧群干细胞211
6.5.3 流式分选间充质干细胞213
6.5.4 流式分选肿瘤干细胞214
参考文献216